产品货号:
BTN91102
中文名称:
柱式骨骼DNA提取试剂盒
英文名称:
Bone DNA extraction kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是专门用于从动物骨骼(包括骨粉)样品中提取DNA的试剂盒,得到的DNA分子量不均匀,一般在100bp到20kb之间,具体取决于骨骼的新鲜程度,骨粉的加工方法等。
- 微量提取,一次可以处理300mg左右的骨骼(但需要先将骨骼变成骨粉)。
- 柱式操作,方法简单,整个过程只需要40~60分钟。
- 得到的DNA可以直接用于PCR或荧光PCR反应。
- 本制品足够20μL体系的50次微量提取。
- 本制品只可用于科研。
组分 | 规格 |
骨骼DNA溶液A | 50mL |
骨骼DNA溶液B | 25mL |
骨骼DNA溶液C | 30mL |
离心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50mL |
DNA洗脱液2.0 | 10mL |
保存:室温,有效期1年。
- 骨粉的制备:用自备酒精将骨骼表面擦洗干净,以防污染物对后续PCR的影响,然后用骨钻在处理干净的骨骼区域钻取骨粉。对于已经制备好的、商品化的骨粉,可以跳过此步,直接进入下一步。
- 用天平称取0.2克骨粉,转移到2mL塑料离心管中。
- 加入1mL溶液A到骨粉中,充分振荡30秒混匀。
- 溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用,且骨粉加到溶液A中后会特别黏稠,需使劲振荡混匀。
- 65℃水浴放置30分钟。
- 加入0.3mL的溶液B和0.2mL的自备氯仿,充分振荡30秒混匀。
- 12000rpm室温离心3分钟,小心将上清液转移到一个新的塑料离心管中。
- 加入0.5mL溶液C,颠倒混匀。
- 将混合液分两次转移到离心吸附柱中,每次转移后需要12000rpm室温离心1分钟,并弃收集管中的穿透液。
- 加入0.5mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
- 再加入0.5mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000rpm室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
- 12000rpm室温离心半分钟,弃含穿透液的收集管。此步干甩十分重要,否则残留的液体会抑制后续的PCR。
- 将离心吸附柱套入到一个自备的干净的1.5mL塑料离心管中,在离心吸附柱的滤膜的中部加入30?L DNA洗脱液,然后室温放置2分钟。如果先将DNA洗脱液预热到60~80℃再使用,效果更佳。
- 12000~15000g室温离心1分钟,离心管中收集的样品即为骨骼DNA。
- 取少量进行电泳检测。
- 一般DNA都呈现弥散状,分布在100bp~20kb这一广泛的范围,其比例跟骨骼(或骨粉)的新鲜程度、加工过程(对骨粉)等因素密切相关。
- DNA样品可以直接用于PCR,也可放-20℃长期保存。
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